對于剛接觸拉曼光譜的研究者,最常提出的問題是:"我需要什么激光激發(fā)波長?" 答案顯然取決于待測材料本身。材料的拉曼散射截面及其物理光學(xué)特性都至關(guān)重要。若樣品對激發(fā)波長透明且足夠薄,可能會檢測到基底材料的光譜貢獻,這種貢獻既可能是拉曼散射也可能是光致發(fā)光。
拉曼光譜中的激光器有許多不同的波長,通常可選擇的范圍從紫外,可見光到近紅外等等。對于某一個特定應(yīng)用的比較好波長并不總是顯而易見的,拉曼實驗中的優(yōu)化需要考慮很多變量,而變量中很多都與波長相關(guān)。
首先,拉曼信號非常弱。它來自于樣品材料中的光子 - 聲子相互作用,而這是一個強度很小的過程。另外,拉曼散射強度與激發(fā)波長的四次方成反比,這意味著在長波長激光激發(fā)的拉曼信號更加弱。
選擇激發(fā)波長時的另一個考慮因素是材料光密度隨波長的變化。如果材料是透明的,則激光束的焦深將由透鏡的數(shù)值孔徑、激光的波長以及該波長處樣品折射率的實際分量決定。但是,如果樣品不透明,則光穿透深度將不是由物理光學(xué)元件決定的,而是由樣品在該波長下的吸收率決定的。這些情況使許多光譜學(xué)家能夠通過改變激發(fā)波長來對半導(dǎo)體等材料進行深度剖析。通常,激發(fā)波長越長,光穿透樣品的深度就越深。市售可見波長激光器的范圍所提供的半導(dǎo)體深度穿透變化與某些微電子器件的制造深度相匹配。
785nm做拉曼的優(yōu)勢
拉曼光譜中最常用的波長是785nm。它兼顧了信號強度、熒光干擾、探測器效率、成本效益和激光器之間的比較好平衡。當(dāng)然,具體的波長還要取決于具體的應(yīng)用。
1. 熒光抑制優(yōu)勢
785nm 屬于近紅外波段,其能量相對較低,能夠大幅降低樣品本底熒光的激發(fā)概率。在生物、高分子材料等容易產(chǎn)生熒光的樣品檢測里,這種特性尤為重要,它可以讓拉曼信號更加清晰地呈現(xiàn)出來。在生物樣品(細胞/組織)、碳材料(石墨烯/碳納米管)、染料/色素等強熒光體系中,785nm可有效提取拉曼信號。
2. 穿透深度與生物兼容性
較低的光子能量使得 785nm 激光器對樣品造成的熱效應(yīng)和光化學(xué)損傷較小。這一優(yōu)勢讓它非常適合用于活體組織、有機分子以及納米材料等對光較為敏感的樣品分析。
3. 信噪比優(yōu)化平衡
785nm 激光處于硅基探測器(如 CCD)的高靈敏度響應(yīng)范圍內(nèi),這樣就無需使用成本較高的制冷型探測器,從而降低了設(shè)備的整體成本。
4. 降低光損傷風(fēng)險
較低的光子能量使得 785nm 激光器對樣品造成的熱效應(yīng)和光化學(xué)損傷較小。這一優(yōu)勢讓它非常適合用于活體組織、有機分子以及納米材料等對光較為敏感的樣品分析。785nm激光器在常規(guī)拉曼檢測中實現(xiàn)了熒光抑制、穿透深度、檢測靈敏度的比較好平衡,是生物醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)等領(lǐng)域的理想選擇。對于特殊需求(如深色樣品需1064nm,無機材料需532nm),建議采用多波長聯(lián)用系統(tǒng)。
審核編輯 黃宇
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